马女士
手机已验证
离职-随时到岗
23岁、经验1年6月、本科·学士
职称/证书:暂无职称/证书
户口、所在城市、婚姻、身高、体重 仅限VIP会员查询 查看VIP权限
| 康强医疗人才网 >> 60万名医生-护士求职 >> 体检/检验/病理找工作 |
| 就职时间 | 就职单位 | 职位 | 月薪 |
| 2024-6至2025-6 | 江苏常州第一人民医院 | 实习实习 | ||
| 常州第一人民医院实习期,各个科室实习,跟随老师做实验,取得优秀毕业设计论文。 | ||||
| 就学时间 | 学历 | 专业 | 毕业院校 | 就学形式 |
| 2021年 至 2025年 | 本科 | 医学检验技术 | 苏州大学 | 全日制 |
| 毕业设计/论文:《常温CbAgo核酸酶半理性设计及活征》 描述:论文核心内容简述 一、选题目的及意义 目的 通过定点突变技术对常温CbAgo核酸酶进行改造,筛选关键氨基酸位点并验证,获得催化效率更高的突变体,优化其常温下的DNA切割活性。 意义 为CbAgo核酸酶在基因编辑、分子诊断等领域的后续临床应用提供有力支撑,同时为其他核酸酶的工程化改造提供参考思路。 二、摘要及关键词 摘要 本研究旨在通过定点突变技术改造常温CbAgo核酸酶以提高其催化活性。选取7个潜在影响酶活性的氨基酸位点(E7A、E616A、D677A、D179A、E211A、E7K、E7R),采用重叠延伸PCR构建突变体质粒并在大肠杆菌中表达,经Ni-NTA亲和层析纯化后,通过SDS-PAGE、Bradford法及荧光报告系统检测蛋白纯度、浓度及酶活性。结果显示,成功构建7个突变体,E616A和D179A表达量较高,E616A和E7R切割活性显著提升(分别为野生型的1.89倍和1.96倍),最适反应镁离子浓度为2.5μM。 关键词 CbAgo核酸酶;分子动力学模拟;定点突变技术;蛋白纯化;酶活性;荧光检测 三、论文结论或成果 1.?借助半理性设计及分子动力学模拟,成功筛选出7个潜在提升酶活性的突变位点,构建并验证了对应的突变体质粒。 2.?纯化后突变体蛋白在70 kDa处出现清晰条带,与预期分子量一致,其中E616A和D179A表达量较高,E7A和D677A表达量较低。 3.?酶活性检测证实,E616A和E7R突变体催化活性显著提升,分别为野生型的1.89倍和1.96倍,确定2.5μM Mg2?为最适反应浓度。 4.?初步实现常温CbAgo核酸酶活性优化,验证了半理性设计在酶工程改造中的有效性,为其生物技术应用奠定基础。 |
||||
|